Сравнительная оценка динамики показателей у больных бронхиальной астмой после применения фитокомплексов.
Г.П. Свиридов, Л.А. Грачева
СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ДИНАМИКИ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КЛЕТОЧНОГО ЗВЕНА ИММУННОЙ СИСТЕМЫ У БОЛЬНЫХ ПРОФЕССИОНАЛЬНОЙ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМОЙ ПОСЛЕ ПРИМЕНЕНИЯ ФИТОТЕРАПЕВТИЧЕСКИХ КОМПЛЕКСОВ И ТРАДИЦИОННОЙ ТЕРАПИИ КОРТИКОСТЕРОИДНЫМИ ГОРМОНАМИ.
ГУ НИИ медицины труда РАМН, Москва; ГУ Российская детская клиническая больница Росздрава, Москва
Изучена динамика фенотипических маркеров иммуноцитов периферической крови больных профессиональной бронхиальной астмой (ПБА) под влиянием фитотерапевтических комплексов по сравнению с традиционной терапией глюкокортикостероидами (ГКС). Показано, что под действием фитокомплексов наблюдается патогенетически направленная положительная динамика фенотипических маркеров периферической крови.
Ключевые слова: клеточное звено иммунной системы, фенотипические маркеры, профессиональная бронхиальная астма, фитотерапевтические комплексы, кортикостероидные гормоны.
По литературным данным последнего десятилетия, при изучении иммунологических механизмов развития астмы установлено, что в патогенезе данного заболевания существенную роль играет замедленная гиперчувствительность, чаще связанная с преобладающим Т2- хелперным ответом (Тх-2) и продукцией IgE. В более поздних работах было показано, что изменения со стороны клеточного звена иммунной системы заключаются в понижении содержания в периферической крови CD4+ лимфоцитов и снижении индекса CD4/ CD8. Анализ биоптатов слизистой оболочки и клеток бронхоальвеолярного лаважа показал нарастание преобладания в репертуаре СD4+ Т- клеток (за счет Т-хелпер 2 типа- клеток, формирующих гуморальный иммунный ответ (Holgate S.T.,1999 г.)).
Предпринимались попытки лечения больных с помощью антилимфоцитарной сыворотки, т.к. механизм её действия — подавление гуморального иммунитета, в основе которого лежит взаимодействие Т-хелперов и В-клеток. Сывороточный полиглобулин стимулирует клеточные и гуморальные защитные иммунные реакции, обмен гистамина и способствует уменьшению воспалительного процесса в бронхолёгочном аппарате.
Л. К. Сулеева и др. (1998) также выявили у 41,3% обследованных больных с БА в периферической крови снижение количества Т- хелперов (СD4+) и понижение индекса CD4/CD8 (его значения у больных с БА были ниже, чем 1,5).
Показано, что персистирующие антигены или антигены, не вызывающие продукции больших количеств ИЛ-12, могут влиять на развитие ответа через Тх-2 типа. Такое возможно в случаях внеклеточных патогенов и аллергенов из окружающей среды. Активация Т-х2 при остром и хроническом воспалении включает реакции гиперчувствительности замедленного типа.
На основании изложенного можно предположить линейную модель развития астмы, которая последовательно включает сенсибилизацию аллергеном, Тх2- опосредованное воспаление и перераспределение пула клеток с фенотипом CD4+ из периферической крови в слизистую бронхов и далее развитие персистирующего характера воспаления,
В связи с этим, нами была изучена динамика фенотипических маркеров иммуноцитов периферической крови больных профессиональной бронхиальной астмой (ПБА) под влиянием применения фитокомплексов по сравнению с традиционной терапией с кортикостероидами.
М а т е р и а л и м е т о д и к и.
Обследовано 140 больных ПБА в возрасте от 28 до 60 лет до и после терапии, из них I гр. — 80 больных ПБА получали в клинике в течение 1 месяца комплексную терапию без глюкокортикостероидов (ГКС) с фитотерапией. В состав фитокомплексов входили следующие травы: плоды аниса, цветки бузины чёрной, корни и корневища девясила, душица обыкновенная, зверобой продырявленный, липа сердцевидная, мелисса лекарственная, мать-и-мачеха обыкновенная, мята перечная, ноготки лекарственные, листья подорожника большого, ромашка аптечная, почки сосны обыкновенной, тысячелистник обыкновенный, чабрец (тимьян ползучий), череда трёхраздельная, обладающие противовоспалительными, регенерирующими, спазмолитическими, отхаркивающими, детоксикационными и иммунокорригирующими свойствами.
II группа — 60 больных ПБА получали традиционную терапию с применением КС. Длительность заболевания составляла от 10 до 14 лет. I группа больных была подразделена на 2 подгруппы: Iа группа — 35 больных ПБА тяжелого течения, стероидозависимой формой, длительность заболевания от 10 до 14 лет, до поступления в клинику получали стероидную терапию курсами. Кортикостероидные препараты вводились различными способами: ингаляционно (беклазон, бекотид, фликсотид от 500 мкг до 1000 мкг/сут), параэнтерально (дексазон 8 мг/сут, преднизолон 60 мг/сут), перорально (полькортолон 16 мг/сут). Iб группа — 45 больных ПБА средней тяжести, стероидонезависимой формой, длительность заболевания также от 10 до 14 лет, до поступления в клинику получали бронхолитическую терапию (эуфиллин, теотард, сальбутамол, беротек). Обследованные больные были сопоставимы по полу, возрасту, стажу работы с вредными веществами, длительности и тяжести заболевания. Больные находились на лечении в отделении фитотерапии клиники ГУ НИИ медицины труда РАМН.
Иммунологические исследования.
Популяции лимфоцитов периферической крови (метод прямой иммунофлуоресценции и проточной цитофлуориметрии с использованием моноклональных антител с двойной меткой (“Behring”, Germany). Учет реакции производили на проточном цитофлюориметре (FACScan, “Becton — Dickenson”, USA). Были изучены: клеточный лимфоцитарный кластер (CD2, CD3, CD4, CD8, CD10, CD19, CD22, CD24, ТСRa/b; ТСRg/d); NK-ассоциированные маркеры (CD16, CD16+CD3+, CD16+CD3-, CD56); активационные маркеры (НLА- DR+ СD3+, CD45)).
Статистическую обработку результатов проводили с помощью критерия Стьюдента методом парных сравнений.
Р е з у л ь т а ты.
При изучении динамики фенотипических маркеров лимфоцитов периферической крови в Iа группе больных ПБА под действием фитотерапевтических комплексов наблюдается положительная динамика иммунологических показателей, которая заключается в двухкратном повышении сниженного до начала лечения в клинике абсолютного и относительного содержания CD4+ клеток (Т-хелперов) в периферической крови (табл.1). Повышение данного показателя приводит к нормализации пониженного до начала лечения иммунорегуляторного индекса (c 0,78±0,01 до 1,58±0,11).
Таблица 1
Динамика экспрессии фенотипических маркеров лимфоцитов у больных ПБА Iа группы под действием фитотерапевтических комплексов
|
СD- маркеры |
Iа гр. до лечения (n=35) | После лечения (n=35) | Нормальные значения | |||
| % | абс.ч. | % | абс.ч. | % | абс.ч. | |
| CD2 | 79,81 ±1,82 | 1,67±0,09 | 81,05±1,87 | 1,92±0,01 | 65-93 | 0,855-2,485 |
| CD3 | 56,63±1,98 | 1,14±0,22 | 68,67±0,81** | 1,60±0,11** | 61-81 | 0,657-2,01 |
| CD4 | 22,26±0,948 | 0,44±0,03 | 40,21±1,76** | 0,93±0,03** | 36-55 | 0,45-1,367 |
| CD8 | 28,62±1,43 | 0,59±0,04 | 25,43±0,55 | 0,53±0,03 | 17-37 | 0,205-0,717 |
| CD4/CD8 | 0,78 | 0,75 | 1,58** | 1,75** | 1,5-2 | |
| СD19 | 7,44±0,63 | 0,114±0,02 | 6,81±0,58 | 0,158 ±0,02 | 5-25 | 0,066-0,541 |
| CD3- CD16+
CD56+ |
23,02±0,94 | 0,52±0,06 | 16,82±0,87; | 0,42±0,03 | 10-19 | 0,2-0,4 |
| СD56 | 17,62±2,84 | 0,4±0,05 | 12,23±1,21* | 0,33±0,03 | 7,3-25,6 | 0,096-0,309 |
| СD3+
HLA-DR+ |
8,61±0,58 | 10,63±1,01 | 8-15 | 0,088-0,682 | ||
Примечание: критерий Стьюдента, метод парного сравнения:
*- понижение показателя под действием терапии (p< 0,05);
** — повышение показателя (p< 0,01).
В группе Iб больных ПБА (не получавших до поступления в клинику терапии КС) под влиянием фитокомплексов такж отмечали повышение количества CD4+ лимфоцитов в периферической крови и нормализацию индекса CD4/CD8 в данной группе больных (табл. 2).
Таблица 2
Динамика экспрессии фенотипических маркеров лимфоцитов у больных ПБА Iб группы под действием фитотерапевтических комплексов
|
СD- маркеры |
Iб гр. до лечения (n=45) | После лечения (n=45) | Нормальные значения | ||||||
| % | абс.ч. | % | абс.ч. | % | абс.ч. | ||||
| CD2 | 79,81 ±1,82 | 1,67±0,09 | 85,05±1,87 | 2,46±0,01 | 65-93 | 0,855-2,485 | |||
| CD3 | 69,63±1,98 | 1,14±0,22 | 76,67±0,81** | 2,19±0,11** | 61-81 | 0,657-2,01 | |||
| CD4 | 26,26±0,94 | 0,49±0,15 | 39,21±1,76** | 1,12±0,03** | 36-55 | 0,45-1,367 | |||
| CD8 | 41,52±1,43 | 0,81±0,04 | 21,43±0,55* | 0,60±0,03 | 17-37 | 0,205-0,717 | |||
| CD4/CD8 | 0,63 | 0,60 | 1,82** | 1,87** | 1,5-2 | ||||
| СD19 | 7,00±0,63 | 0,114±0,02 | 9,01±0,58 | 0,26 ±0,02 | 5-25 | 0,066-0,541 | |||
| CD3- CD16+
CD56+ |
16,01±0,48 | 0,52±0,06 | 11,82±0,87* | 0,32±0,03* | 10-19 | 0,2-0,4 | |||
| СD56 | 14,29±1,04 | 0,4±0,03 | 9,34±0,09* | 0,23±0,03* | 7,3-25,6 | 0,096-0,309 | |||
| СD3+
HLA-DR+ |
11,51±0,58 | 0,22±0,01 | 6,63±1,01* | 0,173±0,01* | 8-15 | 0,088-0,682 | |||
Примечание: критерий Стьюдента, метод парного сравнения:
* — понижение показателя (p< 0,05);
** — повышение показателя (р< 0,01).
Результаты наших исследований по изучению фенотипических маркеров лимфоцитов у больных ПБА до начала терапии подтверждаются данными литературы, свидетельствующими о том, что изменения со стороны клеточного звена иммунной системы у больных БА заключаются в понижении содержания в периферической крови CD4+ лимфоцитов и снижении индекса CD4/ CD8 [5]. Авторы показали также увеличенное содержание СD4+ Т- клеток в бронхоальвеолярном лаваже. Следовательно, при БА CD4+ клетки аккумулируются в слизистой оболочке бронхов, что приводит к структурным и функциональным изменениям стенки дыхательных путей [5].
Нами показано, что под влиянием фитокомплексов происходит нормализация распределения СD4+ Т- клеток, которые из слизистой бронхов переходят в периферическую кровь. Положительное вляние фитокомплексов заключалось также в понижении содержания в периферической крови натуральных киллерных клеток ((CD16+CD56+) и в понижении содержания в периферической крови активированных лимфоцитов (СD3+HLA-DR+).
Во II группе больных, под влиянием лечения КС, также наблюдалась нормализация индекса CD4/CD8, но не за счет повышения содержания CD4+ клеток, сниженного до начала терапии, а за счет понижения нормального до начала терапии содержания CD8+ клеток (табл. 3).
Таблица 3
Динамика экспрессии фенотипических маркеров лимфоцитов у больных ПБА II группы под действием традиционной терапии с ГКС.
| СD — маркеры | II гр. до лечения (n=60) | После лечения (n=60) | Нормальные значения | |||||||
| % | абс.ч. | % | абс.ч. | % | абс.ч. | |||||
| CD3 | 57,63±1,98 | 0,64±0,22 | 62,67±0,81 | 1,39±0,11 | 61-81 | 0,657-2,01 | ||||
| CD4 | 28,61±0,94 | 0,31±0,03 | 27,21±1,76 | 0,3±0,03 | 36-55 | 0,45-1,367 | ||||
| CD8 | 29,21±1,43 | 0,3±0,04 | 13,59±0,55* | 0,15±0,01* | 17-37 | 0,205-0,717 | ||||
| CD4/CD8 | 0,98 | 0,97 | 2,00** | 1,98** | 1,5-2 | — | ||||
| СD20 | 12,80±0,73 | 0,42±0,02 | 9,01±0,58 | 0,34 ±0,02 | 5-25 | 0,066-0,541 | ||||
| СD16 | 15,50±1,04 | — | 13,34±0,09* | — | 6,00-26,00 | 0,096-0,309 | ||||
Примечание: критерий Стьюдента, метод парного сравнения:
*- понижение показателя (p< 0,05);
** -повышение показателя (p< 0,01).
Полученные нами данные о влиянии КС на понижение содержания CD8+ клеток у больных БА, подтверждаются данными литературы [4].
Применение фитотерапевтических комплексов показало их высокую эффективность, о чём свидетельствуют следующие показатели: урежение или прекращение приступов удушья, улучшение показателей функции внешнего дыхания, значительное снижение суточных доз β-агонистов короткого действия (сальбутамол), у 60% больных отменены КС, в остальных случаях суточная доза КС значительно снижена, увеличились сроки ремиссии с 3,3 до 7,7 месяца, уменьшилось число госпитализаций с 2,9 до 0,5 в год.
У больных II группы под действием терапии с ГКС отмечалась менее выраженная клиническая динамика: оставались прежними показатели ФВД, а у некоторых больных наблюдалось ухудшение ФВД. Снижение выраженности приступов удушья не было стабильным, не изменились сроки ремиссии и число госпитализаций.
В ы в о д ы.
- Сравнительный мониторинг фенотипических маркеров иммуноцитов периферической крови у больных ПБА показал, что под действием фитокомплексов наблюдается патогенетически направленная положительная динамика фенотипических маркеров периферической крови, что сопровождается позитивным клиническим эффектом.
- ГКС оказывают иммунодепрессивное действие, не вызывая стойкого клинического эффекта.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- Кеворков Н.Н., Бахметьев Б.А., Черешнев В.А. // Эффективность комплексной иммунотерапии при инфекционно- аллергической бронхиальной астме. // Int. J. on Immuno-rehabilitation, 1997 г., № 7, p.105.
- Погорелова Е. И., Ульянова Л. В. // Использование фитотерапии в комплексном лечении бронхиальной астмы. // 5-й Национальный конгресс по болезням органов дыхания.М., 1995, с. 59.
- Сулеева Л.К., Панина С.С., Лихолат Е.А. // Иммунологический статус у больных с различными заболеваниями легких. // Int. J. on Immunorehabilitation, 1998 г., № 8, p.35.
- Jarvis D. //Эпидемиология тяжелой астмы. // Европейский конгресс по астме, науч. Труды, М., 9-12 сент. 2001 г., том 2, № 1, с. 60.
- Holgate S. T., Davies D. E. // Воспаление дыхательных путей и структурные измененияих стенок при астме — причина или следствие? // Европейский конгресс по астме, науч. Труды, том 2, № 1, с. 9, М., 9-12 сент. 2001 г.
- Romagnoli M., Fabbri M. L. // Патофизиология тяжелой бронхиальной астмы. // Европейский конгресс по астме, науч. Труды, том 2, № 1, с. 55, М., 9-12 сент. 2001 г.
- Yssel H. // Роль Т- клеток в патогенезе астмы. // Европейский конгресс по астме, М., 2001 г., 9-12 сент., науч. Труды, , том 2, № 1, с. 25.